Сообщение
VsePropil » 02.10.19 23:20
Одна забытая статья про природу раковых клеток. От 1968 года.
«МИКРОКИНЕМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ РАЗМНОЖЕНИЯ И МИГРАЦИИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК
Л. Ф. Арендаревский (Киев)
Метод культуры тканей является едва ли не единственным методом, с помощью которого можно создать модель злокачественной опухоли и наблюдать поведение опухолевых клеток как в обычных условиях, так и при воздействии различных анти-бластических факторов.
Неоценимую пользу для изучения опухолевого процесса в динамике его развития может принести метод микрокинематографии. Метод микросъемки нами использован для изучения цитологических особенностей, изменчивости опухолевых клеток, способности их к размножению при создании различных экспериментальных условий.
Микрокиносъемка велась на отечественном аппарате МКУ-1 в замедленном темпе с производством одного кадра в минуту. Исследования проведены на однослойных культурах опухолевых клеток человека (штаммы рака матки, молочной железы , желудка).культуры выращивались в специальных сосудах . Микрокиносьемка производилась с использованием фазовоконтрастной микроскопии и прижизненной окраски культур янусгрюном (1:100 000). Часть культур фиксировалась и окрашивалась гематоксилином Каррачи. В ряде опытов нами использован антибластический препарат бензотеф, синтезированный Л. Д. Проценко, в дозе 25 у/мл.
Микрокиносъемка позволила раскрыть важные свойства злокачественных опухолей и, в первую очередь, некоторые механизмы безудержного размножения опухолевых клеток.
Для однослойной культуры рака молочной железы и матки характерна энергичная и довольно равномерная пролиферация клеточных элементов, ритмичное возникновение округлившихся шариков — клеток, входящих в митотический цикл и заполняющих сплошным слоем большое пространство зоны роста. В зоне полигональных, близко прилежащих друг к другу клеточных элементов, мгновенно возникают округлившиеся, почти полностью изолированные от окружающей массы клетки, с резко увеличенным ядром и ядрышком, узким ободком цитоплазмы. Быстрое растворение ядрышек, ядерной оболочки, возникновение нитей хроматина, сравнительно длительно выраженная стадия мета фазы сопровождается анафазой и телефазой с образованием двух дочерних клеток (рис. 1,а).
Важное значение в интенсивном увеличении опухолевых клеток принадлежит гигантским клеткам. Весьма интересен двоякий механизм образования гигантских клеток — или путем увеличения размеров ядра и цитоплазмы с последующим делением гигантской клетки (рис. 1, б), или же слиянием нескольких клеток в гигантскую клетку, которая разделяется на несколько вполне жизнеспособных клеток (рис. 2,а). Наши данные дают основание считать неправильным мнение ряда исследователей,
которые считают гигантские клетки едва ли не проявлением дегенеративных форм, не способных к дальнейшему делению. На кинокадрах отчетливо видно возникновение гигантских одно-или многоядерных клеток, внезапно округляющихся и выделяющихся своими крупными размерами и затем разделяющихся на 3—5 и больше клеток (рис. 1, а, б). Из клеток с атипическими митозами происходит образование вполне жизнеспособных клеток.
В зависимости от условий окружающей среды интенсивность возникновения митотических фигур деления резко варьирует. При возникновении условий, благоприятствующих интенсивному размножению опухолевых клеток (например, при введении биогенных стимуляторов), скорость размножения клеточных элементов возрастает во много раз: на кинокадрах видна усиленная пролиферация с повсеместно возникающими митозами, с потоком неуклонно размножающихся раковых клеток. Ранее аналогичную стимуляцию опухолевого роста под влиянием биогенного стимулятора плазмола мы наблюдали в культурах карциномы
Броуна — Пирс и аденокарциномы молочной железы мышей. Эти данные подтверждают положение, что и в организме при усилении питания органов и тканей могут создаваться условия, благоприятные для опухолевого роста.
Второй важной особенностью опухолевой клетки является большая склонность к изоляции и распространению на большие пространства. Характер амебоидного движения изолиоованных клеток различный. В резко распластанных клетках выделяется окружающая ядро мелкозернистая эндоплазма, содержащая значительное число включений, и гомогенная эктоплазма, непрерывно изменяющаяся в своих размерах и волнообразными движениями своих выростов перемещающая всю клетку (рис. 2, б). При этом с материнской тканью клеточные элементы связаны длинными, «автоматически» изменяющими свои размеры цитоплазматическими отростками, во много раз превышающими по длине размеры клеток. При отрыве цитоплазматическо-го отростка характерна исключительная самостоятельность поведения опухолевых клеток. Выпуская так называемые кружевные псевдоподии клетка сравнительно быстро и целенаправленно передвигается к отломку другой клетки, инородному телу, останавливается, захватывает его, вновь передвигается в самых различных направлениях, сливается с другими клетками, вновь отделяется от группы клеток, продолжая самостоятельное движение.
При передвижении по поверхности клетка обычно распластывается, движение ее происходит в направлении выпячивания цитоплазмы. Однако нам удалось наблюдать интересный момент-при передвижении клетка сохраняет округлую форму, цитоплазма узким ободком облегает ядро, и этот маленький «комочек» передвигается вдоль длинного цитоплазматического отростка, переброшенного между двумя группами клеток.
При изучении механизма повреждающего действия бензоте-фа в минимально действующих дозах (25 у/мл) отмечаются довольно своеобразные изменения клеточных элементов бла-стомы.
В начальный период, несмотря на введение бензотефа, на кинокадрах отчетливо видно, как клетки еще определенный период размножаются, зона роста увеличивается, но в последующем без дополнительного введения химиопрепарата митозы полностью исчезают из поля зрения, клетки распластываются, увеличиваются в своих размерах, крупные ядра окружаются светлой околоядерной зоной, и в неокрашенных живых клетках культуры ткани выявляются увеличенные ядрышки в виде «глазков», что является специфическим признаком начального повреждения клеток, обычно не наблюдаемых в контрольных культурах. Зона роста постепенно редеет с образованием сетевидных структур.
Довольно характерным для наступающего под влиянием хи-миопрепарата нарушения жизнедеятельности клеток является изменение особенностей миграции клеток. В начальный период при создании не совсем благоприятных условий существования клетки склонность к изоляции, быстрым амебоидным движениям возрастает, выражены явления цитофагии, значительно повышена склонность к обновлению цитоплазмы путем слияния нескольких клеток в гигантский симпласт и амитотическое разделение на отдельные опухолевые клетки (рис. 2, а).
В последующем, возможно за счет повреждения элементов эктоплазмы, передвижение клеток значительно нарушается. Волнообразное ундулирование цитоплазмы замедляется и почти полностью исчезает.
В этих условиях самым неожиданным явилось открытие новой, ранее не отмечавшейся способности раковых клеток передвигаться.
Вместо амебоидного распластывания цитоплазмы в ход пускаются другие механизмы — небольших размеров раковые клетки используют при своем движении своеобразные, интенсивно черные, извивающиеся жгутики, выбрасываемые в виде ножек по обе стороны клетки, движение которых полностью совпадает с усилиями клетки продвигаться (рис. 3).
При фазовоконтрастном изображении и при прижизненной окраске культур янус-грюном отчетливо выявляется структура раковых клеток, находящихся под воздействием бензотефа.
В цитоплазме постепенно накапливаются мелкие гранулы янус-грюна — верный признак нарастающего угнетения жизнедеятельности клеток. В цитоплазме и ядрах образуются небольшие, но неуклонно увеличивающиеся вакуоли. Если при образовании сетевидных структур клетки склонны к изоляции и распространению на большие пространства, то при расположении клетки в пласте поразительным является вращение ядра вокруг своей оси внутри клетки. На кинокадрах обращают на себя внимание структуры, змеевидно извивающиеся из клетки, образно названные нами «жгутики» (рис 4.). Природа этих образований не совсем ясна . Их выхождение и исчезновение прослеживается на протяжении 10-15 кинокадров . На рис. 4 отчетливо видно, что форма и размеры их могут несколько варьировать и исходят они из центральных участков клетки.
Нами прослежен механизм образования гигантской клетки, не способной к дальнейшему делению. В этих случаях ядра образуются путем амитотического перешнуровывания, почкования, клетка может содержать десятки полиморфных ядер, распыленные частицы ядерного вещества. При усилении неблагоприятных условий в ядрах усиливаются процессы почкования, фрагментации. При фазовоконтрастной микроскопии особенно отчетливо выявляется сравнительно быстрое возникновение самых разнообразных по размеру вакуолей, на различных участках цитоплазмы и ядер.
При изучении окрашенных гематоксилином Каррачи препаратов установлено, что по мере нарастания угнетения жизнедеятельности клетки цитоплазма приобретает пенистый характер, соединяясь с ядром очень тонкими паутинообразными ядерно-цитоплазматическими нитями. Ядра самой разнообразной, подчас уродливой формы, с одним-двумя крупными ядрышками, при небольшом количестве (или же полном отсутствии) глыбок хроматина. Структура ядра неоднородна, мелко вакуо-лизирована, с выраженным обеднением хроматиновой субстанции (рис. 5). Постепенно просветления в ядрах превращаются в выраженные вакуоли, причем очень характерной округлой формы, часто вокруг ядрышек, окружая их полностью или же частично. Ядрышки как бы вкраплены в нежную паутину, отчетливо выделяются на фоне мелкоячеистого ядерного вещества. Вакуоли, достигая больших размеров, разрывают ядерную оболочку, разрушают ядро, сливаясь с околоядерным субстратом, и приводят к гибели клетки.
Своеобразное поведение опухолевых клеток отмечено в серии опытов, в питательную среду которой последовательно были введены плазмол (1:500) и бензотеф (50 У/мл). Через 24 часа полностью отсутствовали фигуры митотического деления. Клетки, образующие сетевидную зону роста, распластаны, увеличены в размерах, количество клеточных элементов значительно уменьшено по сравнению с контрольными культурами. Большое количество опухолевых клеток находится в непрерывном движении. От островка или же группы клеток, соединяясь длинными цитоплазматическими отростками , отделяются клетки, которые, выпуская псевдоподии, сравнительно быстро передвигаются по поверхности, сливаются, образуя симпласт, из которого сравнительно быстро возникают отдельные раковые клетки. Клетки целенаправленно передвигаются друг к другу, они могут сливаться, проходить одна мимо другой, и самое удивительное, «пролазить» под клеткой или же группой клеток — большая кругло-овальной формы клетка свободно передвигается на значительном пространстве — на пути ей встречается такая же подвижная вытянутая клетка, которая неожиданно останавливается (рис. 6, а). Первая клетка «пролазит» в узкую капиллярную щель под прилежащей к стеклу клеткой, плотно укрепленной передней и задней частью эктоплазмы (рис. 6, б)'. По напряжению тела сверху лежащей клетки создается впечатление, что она препятствует проползанию другой клетки. По крайней мере, те инородные частицы, которые захватила и несла в своей цитоплазме первая клетка, выдавливаются («процеживаются») и остаются возле другой сверху лежащей клетки. Опухолевая клетка, сильно вытягивая свое тело, проникает под другой клеткой и сразу же приобретает округлую форму (рис. 6,в). В дальнейшем характерно, что относительно быстрое передвижение клетки не сопровождается резким выпячиванием и распластыванием цитоплазмы, а клетка совершает как бы «гусеничнообразные» движения за счет сокращения тела клетки и «переставления» (колебания) передней и задней части эктоплазмы (рис. 6,г)
Опухолевая клетка своей способностью к передвижению на значительные расстояния, неожиданным остановкам, подготовкой к захвату и захватом инородных тел, частиц клеток, изменением направления движения отдаленно напоминает «живой одноклеточный организм».
Методом микрокиносъемки установлено, что прогрессивное увеличение количества опухолевых клеток происходит как за счет митоза, так и путем деления гигантских клеток на несколько вполне жизнеспособных клеточных элементов, сразу в дальнейшем вступающих в обычный митотический цикл. Для опухолевой клетки свойственна высокая склонность к изоляции и амебоидному движению. Виды передвижения клеток носят различный характер: а) путем амебоидного выпячивания и распластывания цитоплазмы, б) «гусеничноподобное» передвижение без выпячивания эктоплазмы, в) передвижение вдоль цито-плазматического отростка (без изменения формы и размеров), г) движение клеток с помощью своеобразных, выбрасываемых по обе стороны клетки псевдоподий («жгутиков», «ножек»). Эти данные свидетельствуют, что раковые клетки из первичного очага могут попадать в кровяное русло не только путем пассивного вымывания клеточных элементов током крови или лимфы, но и путем активного внедрения в окружающие ткани и сосудистое русло.»
Автор осторожничает:
«Опухолевая клетка своей способностью к передвижению на значительные расстояния, неожиданным остановкам, подготовкой к захвату и захватом инородных тел, частиц клеток, изменением направления движения отдаленно напоминает «живой одноклеточный организм».».
Отправлено спустя 16 минут 18 секунд:
По факту, исследователь перевел раковые клетки в амебовидную и жгутиковую формы.
Отправлено спустя 7 минут 56 секунд:
И еще пара фактов.
Факт первый.
"В 1978г микробиолог из Пермского меда. Морова Агния Аркадьевна сделала фундаментальное открытие - "болезни современности" начали свой галопирующий рост после Второй Мировой Войны. Тогда были изобретены антибиотики, безудержное и безграмотное применение которых вызвало подавление естественной бактериальной симбионтной микрофлоры и, как следствие , отключение многих систем в организме. Неправильно сформированный имунитет и т.д. Главным симбионтом она назвала бета- гемолитический стрептококк группы А - создала из неболезнетворного штамма "Гуров" (довоенный музейный штамм, не подвергавшийся воздействию антибиотиков) вакцину ПИРОТАТ и успешно ее применяла для онко- кардиобольных."
Факт второй (из википедии).
"Противораковая вакцина Вильяма Коли — вакцина на основе бактерий Streptococcus pyogenes группы А и Serratia marcescens, которая была создана в конце XIX века американским хирургом-онкологом Вильямом Коли (1862—1936) для лечения людей, больных онкологическими болезнями. Известна также как «вакцина Коли»[1], «токсины Коли»[~ 1], «флюиды Коли»[1][2][3][4].
В 1891 году Вильям Коли установил взаимосвязь между перенесённой инфекцией (скарлатина, рожа), вызванной Streptococcus pyogenes, и регрессией опухоли у пациентов[5][6]. В 1893 году он создал вакцину на основе Streptococcus pyogenes для лечения больных саркомой. Позже в состав вакцины были добавлены бактерии Serratia marcescens, которые усилили её противораковые свойства[7]. Несмотря на большое количество сообщений об успешном применении «противораковой вакцины», она подверглась огромной критике, потому что многие доктора не верили результатам Вильяма Коли. Данная критика вместе с развитием радиотерапии и химиотерапией привели к постепенному прекращению использования вакцины. Тем не менее, современная иммунология доказала, что принципы Вильяма Коли были верными и некоторые формы рака чувствительны к усиленной иммунной системе организма, что и являлось причиной излечения больных. Поскольку, в настоящее время, исследования в данной области ведутся очень активно, Вильям Б. Коли получил титул «Отца иммунотерапии»[8].
В настоящее время данное направление возрождается, относится к области иммунотерапии рака и активно развивается в ряде стран (США, Германия, Япония). В Японии после более чем 30 лет клинических испытаний была выпущена вакцина под названием «пицибанил», которая представлена бактериями Streptococcus pyogenes группы А (особый не патогенный штамм Su). Было обнаружено, что вакцина вызывает в организме человека активацию натуральных киллеров (атакуют опухолевые клетки) и выработку фактора некроза опухоли и интерлейкинов-12. Японский вариант вакцины оказался эффективным в лечении ряда форм рака (рак лёгких, рак молочной железы, рак щитовидной железы, рак желудка и, особенно, при доброкачественной опухоли лимфангиоме)[9].
